España participa en la descripción de un caso de un perro con leishmaniasis resistente al alopurinol

La leishmaniasis es una enfermedad protozoaria causada por Leishmania infantum en humanos, perros y gatos en Europa. En general, la leishmaniasis se considera una enfermedad emergente a nivel mundial, con flebótomos como vectores primarios y perros como el principal reservorio del patógeno. Además de la transmisión vectorial, la transfusión de sangre, la transmisión vertical y la transmisión venérea se han demostrado como fuentes de infecciones caninas por L. infantum. 

El análogo de purina, alopurinol, actúa como un inhibidor de la xantina oxidasa para reducir la concentración sérica de urato y se utiliza para el tratamiento de la gota en medicina humana. En la leishmaniasis canina, la actividad antileishmanial del alopurinol se demostró por inhibición de la enzima leishmanial hipoxantina-guanina fosforribosil transferasa, lo que conduce a una interrupción en la traducción de proteínas y muerte selectiva de los parásitos. 

En medicina veterinaria, el alopurinol es el fármaco de primera línea de elección para el tratamiento a largo plazo de la leishmaniasis canina, aplicado solo o en combinación con antimoniales pentavalentes o miltefosina. Si bien el alopurinol rara vez se usa en medicina humana para el tratamiento de la leishmaniasis humana, es el único fármaco recomendado para su uso en perros por la Organización Mundial de la Salud (OMS). En varios estudios previos, no se demostró una asociación directa entre la recaída de la enfermedad clínica en perros con leishmaniasis y la resistencia a los fármacos. Sin embargo, en 2016, se publicó un primer informe detallado de resistencia al alopurinol en parásitos L. infantum aislados de perros y asociados con la recaída clínica de la enfermedad. 

DESCRIPCIÓN DEL CASO DE UN PERRO CON LEISHMANIASIS RESISTENTE AL ALOPURINOL

La resistencia al alopurinol se ha inducido con éxito in vitro en aislamientos de L. infantum de perros cultivados bajo una presión creciente del fármaco, y se identificaron modificaciones genéticas en aislamientos resistentes, pero hay muy pocos conocimientos sobre la resistencia in vivo en perros. Un trabajo internacional, con participación de los españoles Lluís Ferrer y Marina Carrasco, ha descrito el caso de un perro con resistencia al alopurinol. A una perra Akita Inu esterilizada de dos años de edad, que fue adoptada de un centro de cría cerca de Niza en Francia, se le diagnosticó inicialmente anemia hemolítica inmunomediada primaria. Se inició un tratamiento inmunosupresor y la perra fue derivada para una segunda opinión. Se realizó una prueba de PCR para L. infantum a partir de sangre con EDTA e IFA, así como una prueba ELISA a partir de suero. El perro dio positivo serológicamente para L. infantum y se inició tratamiento con los fármacos antileishmania alopurinol y antimoniato de meglumina.

El examen físico del perro el día 38, después de la primera presentación, no fue notable, lo que indica una mejoría clínica. El día 73, el sedimento de orina reveló una cristaluria de xantina en el análisis de orina, y se aplicó una dieta baja en purinas. El tratamiento con antimoniato de meglumina se terminó y el perro continuó siendo tratado con alopurinol.

RECAÍDA TRAS EL TRATAMIENTO 

El día 351 después de la primera presentación, el propietario no informó ninguna anomalía clínica; Sin embargo, se detectó azotemia leve (18,1 mg/l; RR 5,0-18,0) con una gravedad específica urinaria de 1,016 (RR > 1,025), una leucocituria leve y cristaluria de xantina.

El día 625, se presentó un hematocrito limítrofe (0,37 l/l, RR 0,37-0,63), trombocitopenia (119 × 10 9 /l, RR 148-484 × 10 9 /l) e hiperglobulinemia (51 g/l, RR 25-45 g/l), comparables a los hallazgos del día 0, excepto por el aumento del hematocrito.

El título de anticuerpos para la leishmaniasis se mantuvo en el mismo nivel (1:640) en comparación con el día 0. Se realizó una prueba de PCR para Leishmania en sangre y médula ósea, y reveló una carga parasitaria moderada y alta, respectivamente. Además de alopurinol, se inició nuevamente el tratamiento con antimoniato de meglumina. Después de casi 6 semanas con antimoniato de meglumina, el perro fue reevaluado el día 736 y sus parámetros clínicos estaban dentro de los límites normales.

Se realizó una prueba de resistencia frente a alopurinol, que se asoció con variaciones en el número de copias de cromosomas y genes, incluida una disminución en el número de copias (CN) ​​del gen METK.

Este caso clínico, comentan los autores, es el primero en describir una posible correlación entre la disminución del CN ​​del gen METK de Leishmania y los hallazgos clínicos sugestivos de resistencia en un perro con una recaída de leishmaniasis canina.

Hasta hace poco, añaden, se disponía de datos limitados sobre los valores de corte para la reducción del número de copias ​​del gen METK y la sospecha clínica de resistencia. Se demostró una reducción del número de copias ​​en dos aislamientos de Leishmania con sospecha clínica de resistencia y en cuatro aislamientos con cepas clonales resistentes inducidas experimentalmente, revelando un valor medio de cantidad relativa de 1,02 ± 0,08, mientras que el promedio para los susceptibles fue de 1,48 ± 0,04, con diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos. Estos números “equivalen a dos y tres copias, lo que sugiere una deleción de una copia de este locus en los clones resistentes”. Por tanto, “un punto de corte de < 3 CN puede considerarse sospechoso de resistencia, pero se necesitan más estudios y casos clínicos sospechosos de resistencia para confirmarlo”, añaden.

RIESGO DE INFECCIÓN DE LOS PERROS RESISTENTES 

Así, la consistencia de la recaída clínica de la leishmaniasis canina, los resultados hematológicos y bioquímicos, los resultados de la PCR y serología de L. infantum y la reducción en el CN ​​del gen METK se interpretaron como “altamente sospechosos de resistencia al alopurinol en el perro presentado”. La prueba de PCR “es una herramienta diagnóstica rentable, rápida, confiable, objetiva y altamente específica para la determinación de CN en el gen METK en perros con sospecha clínica de resistencia al alopurinol”.

Ante el hallazgo, concluyen que la resistencia a los fármacos antileishmaniales debe considerarse como una posible causa subyacente en los perros con recaídas de leishmaniasis canina, especialmente si se utiliza alopurinol para el tratamiento a largo plazo. “Los perros con infecciones clínicas por L. infantum también son altamente infecciosos para los flebótomos y, por lo tanto, los perros infectados con cepas resistentes al alopurinol pueden suponer un gran riesgo de infección para perros, gatos y seres humanos no expuestos a la leishmaniasis”.