Nueva prueba rápida diferencia bovinos vacunados e infectados de tuberculosis

La tuberculosis bovina (TBb) es una de las principales enfermedades infecciosas del ganado con graves implicaciones para el bienestar animal, el comercio y la economía. Mycobacterium bovis, el agente causante de la TB en el ganado, pertenece al complejo mycobacterium tuberculosis (MTBC).

A nivel animal individual, la TBb es una enfermedad crónica, a menudo subclínica, que resulta en la formación de “tubérculos” microscópicos o macroscópicos característicos que son en su mayoría pulmonares (pulmones y ganglios linfáticos asociados) o, más raramente, extrapulmonares (intestino, hígado), bazo, etc.).

Como es el caso de la TB humana, la transmisión entre los rebaños de ganado ocurre muy probablemente a través de la ruta del aerosol (a través de la TB pulmonar). Las estimaciones mundiales indican que aproximadamente 50 millones de bovinos están infectados y que la pérdida económica anual sufrida es de 3.000 millones de dólares.

El diagnóstico ante-mortem de TBb se basa en la prueba cutánea de la tuberculina. La prueba consiste en medir la reacción de hipersensibilidad de tipo retardado en el sitio de administración de la tuberculina bovina, generalmente en la región cervical. Esta evaluación comparativa permite distinguir entre el ganado sensibilizado por micobacterias ambientales y el ganado infectado con M. bovis. El grosor de la piel en el lugar de la inyección se controla y compara 72 horas después de la inoculación. En rebaños de ganado con identificación repetida de reactores de TBb, los animales que presentan un aumento del grosor se definen como reactores de TBb.

La prueba cutánea es la más utilizada, pero está sujeta a influencias del operador, coinfecciones, etc., lo que compromete la sensibilidad y la especificidad.

El ensayo de liberación de interferón gamma (IGRA), por el contrario, permite una detección comparativamente temprana después de la infección por M. bovis, pero requiere un equipo de laboratorio sofisticado y que la sangre se procese dentro de las 8 horas posteriores al muestreo, lo que lo hace menos aplicable en entornos remotos.

Por otra parte, la eficacia de la vacunación en el ganado bovino para prevenir enfermedades graves/lesiones del tejido granulomatoso está bien descrita en estudios experimentales y la eficacia protectora, aunque variable, se ha demostrado en ensayos de campo.

Pero el mayor desafío en la adopción de la vacunación como medida de control de la enfermedad, es la sensibilización de los animales vacunados, que luego dan positivo tanto en la prueba dérmica como en IGRA. Esta incapacidad para diferenciar a los animales infectados con M. bovis de animales vacunados dificulta el despliegue de la vacunación como medida de control.

En este sentido, un grupo de investigadores internacionales han propuesto un perfil completo de biomarcadores basados en proteínas del hospedador detectables en suero o sobrenadantes de sangre completa que puedan diferenciar animales con respecto a la infección y el estado de vacunación, y que sería útil para mejorar la sensibilidad y especificidad diagnósticas para el control de la tuberculosis bovina.

DIFERENCIACIÓN ENTRE ANIMALES VACUNADOS E INFECTADOS

Por lo tanto, han realizado un estudio donde analizan nueve proteínas del hospedador en animales sin tratamiento previo con TBb, vacunados, vacunados y expuestos a M. bovis, y expuestos a M. bovis, con el fin de discriminar entre estos grupos y mostrar que las evaluaciones múltiples pueden proporcionar sensibilidad y especificidad adicionales.

Los autores comprobaron que, aunque las concentraciones séricas de la mayoría de las proteínas eran bajas, se encontró que los marcadores proinflamatorios, IL-2, CXCL-9, IP-10 y CCL4, además de IFNγ, estaban significativamente elevados en sangre completa estimulada con tuberculina bovina. La evaluación adicional de estas moléculas en animales vacunados, con o sin exposición posterior a M. bovis, reveló que la IL-2 e IP-10 específicas, además de IFNγ, podrían discriminar a los vacunados y los no vacunados, de los expuestos a M. bovis.

Además, “estas proteínas, junto con CCL4, mostraron potencial para permitir la diferenciación de animales infectados y de animales vacunados”. Esto proporciona una prueba para utilizar múltiples biomarcadores para discriminar animales con respecto a la infección por M. bovis o el estado de vacunación.

En resumen, “nuestros datos brindan evidencia de que el análisis múltiplex es una promesa significativa para la diferenciación de animales vacunados e infectados, y justifica un estudio adicional para desarrollar pruebas rápidas y fáciles de usar para el diagnóstico sensible y específico de la TB bovina”.